Hướng dẫn quy trình tiêm tinh trùng vào bào tương trứng (ICSI)
VẬT LIỆU – DỤNG CỤ
– Kính hiển vi đảo ngược kèm bàn ấm
– Hệ thống vi thao tác
– Đĩa Petri 35 mm
– Kim ICSI và Holding
– Môi trường GMops plus
– Môi trường ICSI (PVP+rHA)
– Mouth pipette có gắn pipette Pasteur đầu nhọn đã kéo trên ngọn lửa đèn cồn.
CHUẨN BỊ ĐĨA ICSI (SÁNG NGÀY OPU)
– Dùng môi trường G-Mops plus tạo 6 giọt với thể tích 5 pL trên nắp đĩa Petri 35 mm. Giọt môi trường ICSI với thể tích 5 pl song song với 6 giọt kia và kéo dài xuống hết chiều dài của 6 giọt. Phủ 2.3 ml dầu và cất vào tủ cấy.
– Tiến hành chích trứng 5 giờ sau chọc hút trứng.
TIẾN HÀNH
– Set up kim để kim Holding và kim ICSI nằm thẳng. Súc cả 2 kim trong giọt môi truờng G-Mops plus.
– Load tinh trùng đã lọc rửa vào phía dưới cùng của giọt PVP để tinh trùng tự bơi lên.
– Chuyển trứng vào các giọt G-Mops plus. Load một trứng vào trung tâm của mỗi giọt. Một lần load tối đa 6 trứng.
– Quá trình load trứng và tinh trùng cần phải được double-check.
– Đặt đĩa Petri lên bàn ấm của kính đảo ngược. Hạ kim ICSI vào giọt PVP, hút PVP vào đoạn đầu của kim ICSI.
– Chọn tinh trùng có hình dạng bình thường, sau đó dùng kim ICSI slash (đánh đuôi) đuôi tinh trùng. Chú ý: không làm tổn thương phần giữa của tinh trùng để tránh tổn thương trung thể của tinh trùng. Sau khi đã bất động tinh trùng hoàn toàn, dùng kim ICSI hút tinh trùng theo chiều đuôi vào trước, giữ tinh trùng ở cách đầu kim ICSI một khoảng 30 pm.
– Tại giọt chứa trứng, hạ kim Holding và hút giữ trứng sao cho thể cực nằm ở vị trí 11/12 giờ hoặc 7/6 giờ.
– Chọn focus vào màng bào tương của trứng, chỉnh rõ kim ICSI.
– Tiêm kim ICSI xuyên qua màng zona pellucida và đâm thủng màng bào tương. Sau
khi đưa kim vào khoảng 2/3 đường kính trứng thì hút một lượng bào tuơng đi ngược vào kim ICSI đến khi cảm nhận màng bào tương đã thủng thì nhả nguợc lại đến khi tinh trùng vừa được nhả ra khỏi kim ICSI thì rút kim ra khỏi trứng.
– Tiếp tục tiêm tinh trùng cho các trứng khác đến khi hết.
– Chuyển trứng vào giọt G-IVF plus đã được chuẩn bị trước. Mỗi đĩa G-IVF plus chứa tối đa 16 trứng. Mỗi giọt chứa 1 trứng.
– Sau đó, cho đĩa G-IVF plus vào tủ ấm 37oC, 6% CO2.
– Tiến hành check thụ tinh 16-18 giờ sau khi ICSI.
Đĩa chích ICSI
Đĩa nuôi cấy
Hướng giải quyết đối với sơ đồ
– Sẽ ban hành Hướng dẫn dạng văn bản pháp qui khổ A4
– Sơ đồ cố gắng trình bày lấp đầy trang A4, để riêng ở trang cuối, lưu ở dạng đồ họa jµg
– Sau này khi in cuốn phác đồ khổ A5, chỉ cần resize 50% sơ đồ, không thể vẽ lại vì rất mất thời gian
Tài liệu tham khảo
– Chỉ trích các tài liệu học thuật: bài báo, sách giáo khoa; các hướng dẫn có uy tín của ACOG, RCOG, WHO,…
– Không trích các tài liệu chưa qua bình duyệt: các báo cáo hội nghị, kỷ yếu,.
– Các quan điểm chẩn đoán, điều trị có thể gây tranh luận, phải có số tài liệu tham khảo kế bên để tiện đọc tài liệu gốc.
GIÁM ĐỐC BỆNH VIỆN HÙNG VƯƠNG
Nguyễn Văn Trương
Bacsidanang.com – Thông tin khám bệnh ở Đà Nẵng, Thiết bị y tế Gia đình Đà Nẵng .
Danh bạ bác sĩ, phòng khám ở Đà Nẵng, dịch vụ y tế, khám tiết niệu nam khoa ở Đà Nẵng, phẫu thuật thẩm mỹ ở Đà Nẵng, thiết bị y tế gia đình Đà Nẵng, thực phẩm chức năng Đà Nẵng.
